აგაროზის გელის ელექტროფორეზის ძირითადი ტექნიკა (1)

1. კლასიფიკაცია

გელის ელექტროფორეზი იყოფა ვერტიკალურ ტიპებად (სვეტის გელებისა და ფილების გელების ჩათვლით) და ჰორიზონტალურ ტიპებად (ძირითადად ფილის გელები) (სურათი 6-18). ზოგადად, ვერტიკალური განცალკევება ოდნავ აღემატება ჰორიზონტალურს, მაგრამ ჰორიზონტალურ გელის მომზადებას აქვს მინიმუმ ოთხი უპირატესობა: არის საყრდენი მთელი გელის ქვეშ, რაც იძლევა დაბალი კონცენტრაციის აგაროზის გამოყენების საშუალებას; შესაძლებელია სხვადასხვა სპეციფიკაციის აგაროზის გელის ფირფიტების მომზადება; გელის მომზადება და ნიმუშის ჩატვირთვა უფრო მოსახერხებელია; ელექტროფორეზის კამერა არის მარტივი ასაწყობი და ეკონომიური. ვინაიდან ჰორიზონტალური ელექტროფორეზი ტარდება აგაროზის გელის ფირფიტით სრულად ჩაძირული ელექტროფორეზის ბუფერის ზედაპირიდან დაახლოებით 1 მმ ქვემოთ, მას ასევე უწოდებენ წყალქვეშა ელექტროფორეზის.

图片2

ელექტროფორეზის ავზი DYCP-31DN აგაროზის გელის ელექტროფორეზისთვის

2.ბუფერული სისტემა

ნუკლეინის მჟავების გამოყოფისას, სისტემების უმეტესობა იღებს უწყვეტ სისტემებს. ხშირად გამოყენებული ელექტროფორეზის ბუფერები მოიცავს TBE (0.08 მოლ/ლ ტრის· HCl, pH 8.5, 0.08 მოლ/ლ ბორის მჟავას, 0.0024 მოლ/ლ EDTA) ბუფერს და THE (0.04 მოლ/ლ ტრის· HCl, pH 7.8, 0.02მლ. ნატრიუმის აცეტატი, 0.0018მოლ/ლ EDTA) ბუფერი. ეს ბუფერები ძირითადად მზადდება 10x მარაგის ხსნარის სახით და გამოყენებისას განზავებულია საჭირო კონცენტრაციამდე. ხაზოვანი და წრიული დნმ-ის მიგრაციის სიჩქარე აგაროზის გელში განსხვავდება გამოყენებული ბუფერიდან გამომდინარე. THE ბუფერში, ხაზოვანი დნმ-ის მიგრაციის სიჩქარე უფრო დიდია, ვიდრე წრიული დნმ-ის, ხოლო TBE ბუფერში, პირიქით.

3

3.აგაროზის გელის მომზადება

(1) ჰორიზონტალური აგაროზის გელის მომზადება

(ა) მოამზადეთ აგაროზის გელის საჭირო კონცენტრაცია 1x ელექტროფორეზის ბუფერის გამოყენებით.

(ბ) გააცხელეთ აგაროზა სრულ დაშლამდე ან მდუღარე წყლის აბაზანაში, მაგნიტურ შემრევზე ან მიკროტალღურ ღუმელში. გააგრილეთ აგაროზის ხსნარი 55°C-მდე და დაამატეთ ეთიდიუმის ბრომიდი (EB) საღებავი საბოლოო კონცენტრაციამდე 0,5 მკგ/მლ.

(გ) დალუქეთ მინის ან აკრილის ფირფიტების კიდეები მცირე რაოდენობით აგაროზის გელით, დაამატეთ სავარცხელი და მოათავსეთ სავარცხლის კბილები დაახლოებით 0,5-1,0 მმ ფირფიტის ზემოთ.

(დ) გამდნარი აგაროზის გელის ხსნარი განუწყვეტლივ ჩაასხით შუშის ან აკრილის ფირფიტის ფორმაში (სისქე დამოკიდებულია დნმ-ის ნიმუშის მოცულობაზე), თავიდან აიცილოთ ჰაერის ბუშტები. ოთახის ტემპერატურაზე ბუნებრივად გამაგრდეს.

(ე) ფრთხილად ამოიღეთ სავარცხელი სრული გამაგრების შემდეგ. დაამატეთ ელექტროფორეზის ბუფერის შესაბამისი რაოდენობა გელის ავზში, დარწმუნდით, რომ გელის ფირფიტა ჩაძირულია ელექტროფორეზის ბუფერის ზედაპირიდან დაახლოებით 1 მმ-ით.

(2) ვერტიკალური აგაროზის გელის მომზადება

(ა) ამოიღეთ ცხიმი ან ნარჩენები მინის ფირფიტებიდან ეთანოლით გარეცხვით.

(ბ) მოათავსეთ სპეცერის ფირფიტები წინა და უკანა კაშხლებს შორის, გაასწორეთ სპაისერი ფირფიტების კიდეები წინა და უკანა კაშხლებთან და დაამაგრეთ ისინი დამჭერებით.

(გ) დაამატეთ 2% აგაროზა 1x ბუფერში დისტანციური ფირფიტების კიდეებს შორის, რათა წარმოიქმნას 1 სმ სიმაღლის აგაროზის საცობი გელის ჩამოსხმის კამერის ბოლოში.

(დ) დაასხით გამდნარი აგაროზის გელი სასურველი კონცენტრაციით, მომზადებული 1x ბუფერში, გელის კამერაში ზემოდან 1 სმ-მდე.

(ე) ჩადეთ სავარცხელი, რათა თავიდან აიცილოთ ჰაერის ბუშტები სავარცხლის კბილების ქვეშ. ზოგჯერ სავარცხლის კბილებზე ნაოჭები შეიძლება გაჩნდეს აგაროზის გელის გაგრილების დროს; ასეთ შემთხვევებში, უბრალოდ დაამატეთ ცოტაოდენი გამდნარი აგაროზა, რომ გამაგრდეს.

(ვ) ამოიღეთ სავარცხელი. ჩატვირთვის ჭრილში ბუფერის გაჟონვის თავიდან ასაცილებლად, დალუქეთ კავშირი აგაროზის გელის ფირფიტასა და ელექტროფორეზის კამერას შორის 2% აგაროზით და დაამატეთ ბუფერის საჭირო რაოდენობა.

(ზ) დაამატეთ 1x ელექტროფორეზის ბუფერი გელის კამერაში.

(თ) ფრთხილად ჩატვირთეთ დნმ-ის ნიმუშები ბუფერის ქვეშ მდებარე აგაროზის გელზე.

3

დამატებით ინფორმაციას აგაროზის გელის ელექტროფორეზის შესახებ საბაზისო ცოდნის შესახებ მომავალ კვირას გაგიზიარებთ. გისურვებთ, რომ ეს ინფორმაცია სასარგებლო იყოს თქვენი ექსპერიმენტისთვის.

შპს Beijing Liuyi Biotechnology Co. (Liuyi Biotechnology) სპეციალიზირებულია ელექტროფორეზის ინსტრუმენტების წარმოებაში 50 წელზე მეტი ხნის განმავლობაში ჩვენი საკუთარი პროფესიული ტექნიკური გუნდისა და R&D ცენტრით. ჩვენ გვაქვს საიმედო და სრული საწარმოო ხაზი დიზაინიდან შემოწმებამდე და საწყობი, ასევე მარკეტინგული მხარდაჭერა. ჩვენი ძირითადი პროდუქტებია ელექტროფორეზის უჯრედი (ავზი/კამერა), ელექტროფორეზის კვების წყარო, ლურჯი LED ტრანსილუმინატორი, ულტრაიისფერი ტრანსლიმინატორი, გელის გამოსახულების და ანალიზის სისტემა და ა.შ.

ჩვენ ახლა ვეძებთ პარტნიორებს, მივესალმებით როგორც OEM ელექტროფორეზის ავზს, ასევე დისტრიბუტორებს.

თუ თქვენ გაქვთ რაიმე შეძენის გეგმა ჩვენი პროდუქციისთვის, გთხოვთ, ნუ მოგერიდებათ დაგვიკავშირდეთ. შეგიძლიათ გამოგვიგზავნოთ შეტყობინება ელექტრონული ფოსტით[ელფოსტა დაცულია]ან[ელფოსტა დაცულია], ან გთხოვთ დაგვიკავშირდეთ +86 15810650221 ან დაამატეთ Whatsapp +86 15810650221, ან Wechat: 15810650221.

გთხოვთ, დაასკანიროთ QR კოდი Whatsapp-ზე ან WeChat-ზე დასამატებლად.

2


გამოქვეყნების დრო: დეკ-07-2023