Comet Assay (Single Cell Gel Electrophoresis, SCGE) არის მგრძნობიარე და სწრაფი ტექნიკა, რომელიც ძირითადად გამოიყენება ცალკეულ უჯრედებში დნმ-ის დაზიანების გამოსავლენად და აღდგენისთვის. სახელწოდება "კომეტის ანალიზი" მომდინარეობს კომეტის მსგავსი დამახასიათებელი ფორმისგან, რომელიც ჩნდება შედეგებში: უჯრედის ბირთვი ქმნის "თავი", ხოლო დაზიანებული დნმ-ის ფრაგმენტები მიგრირებს და ქმნის კომეტას მსგავს "კუდს".
პრინციპი
Comet Assay-ის პრინციპი ემყარება დნმ-ის ფრაგმენტების მიგრაციას ელექტრულ ველში. ხელუხლებელი დნმ რჩება უჯრედის ბირთვში, ხოლო დაზიანებული ან ფრაგმენტული დნმ მიგრირებს ანოდისკენ და ქმნის კომეტის „კუდს“. კუდის სიგრძე და ინტენსივობა პირდაპირპროპორციულია დნმ-ის დაზიანების ზომაზე.
პროცედურა
- უჯრედის მომზადება: შესამოწმებელი უჯრედები შერეულია დაბალი დნობის წერტილის აგაროზასთან და ვრცელდება მიკროსკოპის სლაიდებზე, რათა შექმნან ერთიანი ფენა.
- უჯრედის ლიზისი: სლაიდები ჩაეფლო ლიზისის ხსნარში, რათა ამოიღონ უჯრედის მემბრანა და ბირთვული მემბრანა, გამოაშკარავდეს დნმ-ს.
- ელექტროფორეზი: სლაიდები მოთავსებულია ელექტროფორეზის კამერაში ტუტე ან ნეიტრალურ პირობებში. დაზიანებული დნმ-ის ფრაგმენტები ელექტრული ველის გავლენით მიგრირებს დადებითი ელექტროდისკენ.
- შეღებვა: ელექტროფორეზის შემდეგ, სლაიდები შეღებილია ფლუორესცენტური საღებავით (მაგ., ეთიდიუმის ბრომიდი) დნმ-ის ვიზუალიზაციისთვის.
- მიკროსკოპული ანალიზი: ფლუორესცენტული მიკროსკოპის ან სპეციალიზებული პროგრამული უზრუნველყოფის გამოყენებით, ხდება კომეტის ფორმების ანალიზი და ისეთი პარამეტრების გაზომვა, როგორიცაა კუდის სიგრძე და ინტენსივობა.
სურათი ბიორენდერიდან
მონაცემთა ანალიზი
Comet Assay-ის შედეგები შეფასებულია რამდენიმე ძირითადი პარამეტრის საფუძველზე:
- კუდის სიგრძე: წარმოადგენს დნმ-ის მიგრაციის მანძილს, რაც მიუთითებს დნმ-ის დაზიანების ზომაზე.
- კუდის დნმ-ის შინაარსი: დნმ-ის პროცენტი, რომელიც მიგრირებს კუდში, ხშირად გამოიყენება დნმ-ის დაზიანების რაოდენობრივ საზომად.
- ზეთისხილის კუდის მომენტი (OTM): აერთიანებს როგორც კუდის სიგრძეს, ასევე კუდის დნმ-ის შინაარსს, რათა უზრუნველყოს დნმ-ის დაზიანების უფრო სრულყოფილი ზომა.
აპლიკაციები
- გენოტოქსიკურობის კვლევებიComet Assay ფართოდ გამოიყენება ქიმიკატების, წამლებისა და რადიაციის ზემოქმედების შესაფასებლად უჯრედის დნმ-ზე, რაც მას გენოტოქსიურობის ტესტირების მთავარ ინსტრუმენტად აქცევს.
- გარემოს ტოქსიკოლოგია: ის გვეხმარება ორგანიზმების დნმ-ზე გარემოს დამაბინძურებლების გავლენის ანალიზში, ეკოსისტემის უსაფრთხოების შესახებ ინფორმაციის მიწოდებაში.
- სამედიცინო და კლინიკური კვლევებიComet Assay გამოიყენება დნმ-ის აღდგენის მექანიზმების, კიბოს და დნმ-თან დაკავშირებული სხვა დაავადებების შესასწავლად. ის ასევე აფასებს კიბოს თერაპიის ზემოქმედებას, როგორიცაა რადიოთერაპია და ქიმიოთერაპია დნმ-ზე.
- სურსათისა და სოფლის მეურნეობის მეცნიერებები: გამოიყენება პესტიციდების, საკვები დანამატების და სხვა ნივთიერებების უსაფრთხოების შესაფასებლად და მათი ტოქსიკური ზემოქმედების შესასწავლად ცხოველურ მოდელებში.
უპირატესობები
- მაღალი მგრძნობელობა: შეუძლია დნმ-ის დაზიანების დაბალი დონის გამოვლენა.
- მარტივი ოპერაცია: ტექნიკა მარტივია, რაც მას შესაფერისს ხდის მაღალი გამტარუნარიანობის სკრინინგს.
- ფართო აპლიკაცია: მისი გამოყენება შესაძლებელია სხვადასხვა ტიპის უჯრედებზე, მათ შორის ცხოველურ და მცენარეულ უჯრედებზე.
- რაოდენობრივი გამოწვევები: დნმ-ის დაზიანების შესახებ ხარისხობრივი მონაცემების მოწოდებისას, რაოდენობრივი ანალიზი დიდწილად ეყრდნობა პროგრამულ უზრუნველყოფას და გამოსახულების ანალიზის ტექნიკას.
- ექსპერიმენტული პირობები: შედეგებზე შეიძლება გავლენა იქონიოს ფაქტორებმა, როგორიცაა ელექტროფორეზის დრო და pH, რაც მოითხოვს ექსპერიმენტული პირობების ფრთხილად კონტროლს.
შეზღუდვები
Comet Assay არის ფასდაუდებელი ინსტრუმენტი ბიოსამედიცინო კვლევებში, გარემოსდაცვითი მეცნიერებისა და წამლების შემუშავებაში მისი მოქნილობისა და მაღალი მგრძნობელობის გამო დნმ-ის დაზიანების გამოვლენისა და შეკეთებისას. შპს Beijing Liuyi Biotechnology Co. (Liuyi Biotechnology)გთავაზობთ ჰორიზონტალურ ელექტროფორეზის კამერას კომეტის ანალიზისთვის. კეთილი იყოს თქვენი მობრძანება დაგვიკავშირდით, რათა განიხილოთ ამის შესახებკომეტის ანალიზიპროტოკოლი.
შპს Beijing Liuyi Biotechnology Co. (Liuyi Biotechnology) სპეციალიზირებულია ელექტროფორეზის ინსტრუმენტების წარმოებაში 50 წელზე მეტი ხნის განმავლობაში ჩვენი საკუთარი პროფესიული ტექნიკური გუნდისა და R&D ცენტრით. ჩვენ გვაქვს საიმედო და სრული საწარმოო ხაზი დიზაინიდან შემოწმებამდე და საწყობი, ასევე მარკეტინგული მხარდაჭერა. ჩვენი ძირითადი პროდუქტებია ელექტროფორეზის უჯრედი (ტანკი/კამერა), ელექტროფორეზის კვების წყარო, ლურჯი LED ტრანსილუმინატორი, ულტრაიისფერი ტრანსლიმინატორი, ლარი გამოსახულების და ანალიზის სისტემა და ა.შ.
თუ თქვენ გაქვთ რაიმე შეძენის გეგმა ჩვენი პროდუქციისთვის, გთხოვთ, ნუ მოგერიდებათ დაგვიკავშირდეთ. შეგიძლიათ გამოგვიგზავნოთ შეტყობინება ელექტრონული ფოსტით[ელფოსტა დაცულია]ან[ელფოსტა დაცულია], ან გთხოვთ დაგვიკავშირდეთ +86 15810650221 ან დაამატეთ Whatsapp +86 15810650221, ან Wechat: 15810650221.
გთხოვთ, დაასკანიროთ QR კოდი Whatsapp-ზე ან WeChat-ზე დასამატებლად.
გამოქვეყნების დრო: სექ-20-2024