გელის ელექტროფორეზი არის ერთ-ერთი მთავარი მეთოდი, რომელიც გამოიყენება მოლეკულურ ბიოლოგიაში დნმ-ის ანალიზისთვის. ეს მეთოდი გულისხმობს დნმ-ის ფრაგმენტების მიგრაციას გელის მეშვეობით, სადაც ისინი გამოიყოფა ზომის ან ფორმის მიხედვით. თუმცა, ოდესმე შეგხვედრიათ რაიმე შეცდომა ელექტროფორეზის ექსპერიმენტების დროს, როგორიცაა ზოლები აგაროზის გელზე, ან გელზე ზოლების გარეშე? რა შეიძლება იყოს ამ შეცდომების მიზეზი?
ჩვენმა ტექნიკოსებმა შეაჯამეს პრობლემების მოგვარების წყვილი აქ თქვენი მითითებისთვის.
1. გაწურული ზოლები აგაროზის გელზე
●დნმ დეგრადირებული იყო. მოერიდეთ ნუკლეაზებით დაბინძურებას.
● ელექტროფორეზის ბუფერი ახალი არ არის. ელექტროფორეზის ბუფერის განმეორებითი გამოყენების შემდეგ, იონური სიძლიერე მცირდება და მისი pH მნიშვნელობა იზრდება, ამიტომ ბუფერული სიმძლავრე სუსტდება, რაც გავლენას ახდენს ელექტროფორეზის ეფექტზე. რეკომენდირებულია ელექტროფორეზის ბუფერის ხშირად გამოცვლა.
● გამოყენებული იყო ელექტროფორეზის არასწორი პირობები. არ დაუშვათ ძაბვა 20 ვ/სმ-ზე მეტი და შეინარჩუნეთ ტემპერატურა <30°C ელექტროფორეზის დროს. გიგანტური დნმ-ის ჯაჭვის ელექტროფორეზისთვის ტემპერატურა უნდა იყოს <15°C. შეამოწმეთ ელექტროფორეზის ბუფერს აქვს საკმარისი ბუფერული ტევადობა.
● ძალიან ბევრი დნმ დაიტვირთა გელზე. შეამცირეთ დნმ-ის რაოდენობა.
● ძალიან ბევრი მარილი დნმ-ში. გამოიყენეთ ეთანოლის ნალექი ჭარბი მარილების წინასწარ მოსაშორებლად.
● დნმ დაბინძურებული იყო ცილებით. გამოიყენეთ ფენოლის ექსტრაქტები, რათა ამოიღოთ ცილები წინასწარ.
● დნმ დენატურირებული იყო. არ გაცხელოთ ელექტროფორეზის წინ. განზავდეს დნმ ბუფერში 20 მმ NaCl-ით.
2. ანომალიები დნმ ზოლის მიგრაცია
● λHind III ფრაგმენტის COS უბნის რენატურაცია. გააცხელეთ დნმ 5 წუთის განმავლობაში 65°C-ზე ელექტროფორეზის წინ და შემდეგ გააცივეთ ყინულზე 5 წუთის განმავლობაში.
● გამოყენებული იყო ელექტროფორეზის არასწორი პირობები. არ დაუშვათ ძაბვა 20 ვ/სმ-ზე მეტი და შეინარჩუნეთ ტემპერატურა <30°C ელექტროფორეზის დროს. შეამოწმეთ ელექტროფორეზის ბუფერს აქვს საკმარისი ბუფერული ტევადობა.
● დნმ დენატურირებული იყო. არ გაცხელოთ ელექტროფორეზის წინ. განზავდეს დნმ ბუფერში 20 მმ NaCl-ით.
3. სუსტი ან არ არის დნმ-ის ზოლები აგაროზის გელზე
● გელზე დატვირთული იყო დნმ-ის არასაკმარისი რაოდენობა ან კონცენტრაცია. გაზარდეთ დნმ-ის რაოდენობა. პოლიაკრილამიდის გელის ელექტროფორეზი ოდნავ უფრო მგრძნობიარეა ვიდრე აგაროზის ელექტროფორეზი და ნიმუშის დატვირთვა შეიძლება შემცირდეს სათანადოდ.
● დნმ დეგრადირებული იყო. მოერიდეთ ნუკლეაზებით დაბინძურებას.
● დნმ-ს ელექტროფორეზი გაუკეთეს გელისგან. გაატარეთ გელის ელექტროფორზე ნაკლები დროით, გამოიყენეთ უფრო დაბალი ძაბვა ან გამოიყენეთ უფრო მაღალი პროცენტული გელი.
● არასწორი W სინათლის წყარო გამოიყენებოდა ეთიდიუმ ბრომიდით შეღებილი დნმ-ის ვიზუალიზაციისთვის. გამოიყენეთ მოკლე ტალღის სიგრძის (254 ნმ) W შუქი მეტი მგრძნობელობისთვის.
4. დაკარგული დნმ-ის ზოლები
●მცირე ზომის დნმ-ის ელექტროფორიზაცია მოხდა გელისგან. გაატარეთ გელის ელექტროფორზე ნაკლები დროით, გამოიყენეთ უფრო დაბალი ძაბვა ან გამოიყენეთ უფრო მაღალი პროცენტული გელი.
● რთულია მსგავსი მოლეკულური დნმ-ის ზოლების გარჩევა. გაზარდეთ ელექტროფორეზის დრო და შეამოწმეთ კონცენტრაციაგელი, რათა დარწმუნდეთ, რომ გელი სწორად იქნება გამოყენებული.
● დნმ დენატურირებული იყო. არ გაცხელოთ ელექტროფორეზის წინ. განზავდეს დნმ ბუფერში 20 მმ NaCl-ით.
● დნმ-ის ჯაჭვები უზარმაზარია და ჩვეულებრივი გელის ელექტროფორეზი არ არის შესაფერისი. პულსური გელის ელექტროფორეზის ანალიზი.კიდევ რა პრობლემები გქონდათ აგაროზის გელის ელექტროფორეზის დროს? მომავალში უფრო მეტს გამოვიკვლევთ გიდებისთვის.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) არის სპეციალიზებული კომპანია, რომელიც ფოკუსირებულია ელექტროფორეზისთან დაკავშირებულ პროდუქტებზე ჩინეთში. მისი ისტორია იწყება 1970 წელს, როდესაც ჩინეთი ჯერ კიდევ არ იყო შესული რეფორმისა და გახსნის დროში. წლების განვითარებით, Liuyi Bitotech-ს აქვს საკუთარი ბრენდი, რომელიც ცნობილია როგორც Liuyi ბრენდი ელექტროფორეზის პროდუქტების შიდა ბაზარზე.
Liuyi ბრენდს ჩინეთში 50 წელზე მეტი ხნის ისტორია აქვს და კომპანიას შეუძლია უზრუნველყოს სტაბილური და მაღალი ხარისხის პროდუქტები მთელ მსოფლიოში. წლების განვითარებით, ის თქვენი არჩევანის ღირსია!
Liuyi Biotech-ის ჰორიზონტალური ელექტროფორეზის უჯრედები (ტანკები/კამერები) არის მაღალი ხარისხის კარგი გარეგნობით. სხვადასხვა ზომის გელის უჯრით, მათ შეუძლიათ დააკმაყოფილონ თქვენი სხვადასხვა ექსპერიმენტული მოთხოვნები. ჩვენ გვყავს საკუთარი ტექნიკური გუნდი და ქარხანა. დიზაინიდან წარმოებამდე, ნედლეულიდან ძირითად ნაწილებამდე, ჩვენ შეგვიძლია გავაკონტროლოთ მთელი პროცესი. DYCP 31 სერია განკუთვნილია დნმ ელექტროფორეზისთვის, რომლებიც მოდელიაDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, დაDYCP-31E. მათ შორის განსხვავებებია გელის ზომები და ფასი. ჩვენ გთავაზობთ პროდუქციის სრულ ზომას ჩვენს მომხმარებლებს. მოდელიDYCP-32Cშეუძლია გააკეთოს ყველაზე დიდი ლარი 250მმ*250მმ.
იმავდროულად, ჩვენ გირჩევთ ელექტროფორეზის ელექტრომომარაგებასDYY-6C,DYY-6DდაDYY-10Cჩვენი ელექტროფორეზის უჯრედებისთვის (ტანკები/კამერები) DYCP-31 და 32 სერიებისთვის.
თუ გსურთ მეტი ინფორმაცია პროდუქტების შესახებ, გთხოვთ, ეწვიოთ ამ ვებსაიტს, რომ მიიღოთ მეტი, და კეთილი იყოს თქვენი მობრძანება დაგვიკავშირდეთ ელექტრონული ფოსტით, რომ შეგვატყობინოთ რა გსურთ და ვნახოთ, შეგვიძლია თუ არა თქვენთვის გადაწყვეტილებების მოწოდება.
ჩვენს შესახებ დამატებითი ინფორმაციისთვის გთხოვთ დაგვიკავშირდეთ ელექტრონული ფოსტით[ელფოსტა დაცულია], [ელფოსტა დაცულია].
გამოქვეყნების დრო: მაისი-09-2022