რა არის პოლიაკრილამიდის გელის ელექტროფორეზი?

პოლიაკრილამიდის გელის ელექტროფორეზი

გელის ელექტროფორეზი არის ფუნდამენტური ტექნიკა ლაბორატორიებში ბიოლოგიურ დისციპლინებში, რომელიც იძლევა მაკრომოლეკულების განცალკევებას, როგორიცაა დნმ, რნმ და ცილები. განცალკევების სხვადასხვა საშუალებები და მექანიზმები საშუალებას აძლევს ამ მოლეკულების ქვეჯგუფებს უფრო ეფექტურად გამოიყოს მათი ფიზიკური მახასიათებლების გამოყენებით. განსაკუთრებით პროტეინებისთვის, პოლიაკრილამიდის გელის ელექტროფორეზი (PAGE) ხშირად არჩევის ტექნიკაა.

PAGE არის ტექნიკა, რომელიც გამოყოფს მაკრომოლეკულებს, როგორიცაა ცილები, მათი ელექტროფორეზული მობილურობის საფუძველზე, ანუ ანალიზების უნარის გადაადგილება საპირისპირო მუხტის ელექტროდისკენ. PAGE-ში ამას განსაზღვრავს მოლეკულის მუხტი, ზომა (მოლეკულური წონა) და ფორმა. ანალიტები მოძრაობენ პოლიაკრილამიდის გელში წარმოქმნილ ფორებში. დნმ-ისა და რნმ-ისგან განსხვავებით, ცილები განსხვავდება ამინომჟავების მიხედვით, რაც გავლენას ახდენს მათ მუშაობაზე. ამინომჟავის სიმები ასევე შეიძლება ჩამოაყალიბონ მეორადი სტრუქტურები, რომლებიც გავლენას ახდენენ მათ აშკარა ზომაზე და, შესაბამისად, იმაზე, თუ როგორ შეუძლიათ მათ გადაადგილება ფორებში. ამიტომ ზოგჯერ შეიძლება სასურველი იყოს ცილების დენატურაცია ელექტროფორეზის წინ მათი წრფივირებისთვის, თუ საჭიროა ზომის უფრო ზუსტი შეფასება.

SDS გვერდი

ნატრიუმ-დოდეცილ სულფატის პოლიაკრილამიდის გელის ელექტროფორეზი არის ტექნიკა, რომელიც გამოიყენება 5-დან 250 kDa-მდე მასის ცილის მოლეკულების გამოსაყოფად. ცილები გამოყოფილია მხოლოდ მათი მოლეკულური წონის მიხედვით. ნატრიუმის დოდეცილ სულფატი, ანიონური ზედაპირულად აქტიური ნივთიერება, ემატება გელების მომზადებას, რომელიც ფარავს ცილის ნიმუშების შინაგან მუხტს და აძლევს მათ მსგავსი მუხტის თანაფარდობას მასის მიმართ. მარტივი სიტყვებით, ის დენატურაციას უკეთებს ცილებს და აძლევს მათ უარყოფით მუხტს.

მშობლიური გვერდი

Native PAGE არის ტექნიკა, რომელიც იყენებს არადენატურირებულ გელებს ცილების გამოყოფისთვის. SDS PAGE-ისგან განსხვავებით, გელების მომზადებაში დენატურაციის საშუალება არ არის დამატებული. შედეგად, ცილების გამოყოფა ხდება ცილების მუხტისა და ზომის მიხედვით. ამ ტექნიკაში, ცილების კონფორმაცია, დასაკეცი და ამინომჟავური ჯაჭვები არის ის ფაქტორები, რომლებზეც დამოკიდებულია განცალკევება. ცილები ამ პროცესში არ ზიანდება და მათი აღდგენა შესაძლებელია განცალკევების დასრულების შემდეგ.

როგორ მუშაობს პოლიაკრილამიდის გელის ელექტროფორეზი (PAGE)?

PAGE-ის ძირითადი პრინციპია ანალიტების გამოყოფა პოლიაკრილამიდის გელის ფორებში ელექტრული დენის გამოყენებით. ამის მისაღწევად, აკრილამიდ-ბისაკრილამიდის ნარევი პოლიმერიზებულია (პოლიაკრილამიდი) ამონიუმის პერსულფატის (APS) დამატებით. რეაქცია, რომელიც კატალიზებულია ტეტრამეთილეთილენდიამინის (TEMED) მიერ, ქმნის ქსელის მსგავს სტრუქტურას ფორებით, რომლის მეშვეობითაც ანალიზებს შეუძლიათ გადაადგილება (სურათი 2). რაც უფრო მაღალია გელში შემავალი მთლიანი აკრილამიდის პროცენტი, მით უფრო მცირეა პორების ზომა, შესაბამისად, მით უფრო მცირეა პროტეინები, რომლებიც შეძლებენ გავლას. აკრილამიდის თანაფარდობა ბისაკრილამიდთან ასევე იმოქმედებს ფორების ზომაზე, მაგრამ ეს ხშირად მუდმივია. მცირე ფორების ზომები ასევე ამცირებს სიჩქარეს, რომლითაც მცირე პროტეინებს შეუძლიათ გადაადგილება გელში, აუმჯობესებს მათ გარჩევადობას და ხელს უშლის მათ სწრაფად გაშვებას ბუფერში დენის გამოყენებისას.

მოწყობილობა პოლიაკრილამიდის გელის ელექტროფორეზისთვის

გელის ელექტროფორეზის უჯრედი (ავზი/კამერა)
გელის ავზი პოლიაკრილამიდის გელის ელექტროფორეზისთვის (PAGE) განსხვავდება აგაროზის გელის ავზისაგან. აგაროზის გელის ავზი ჰორიზონტალურია, ხოლო PAGE ავზი ვერტიკალურია. ვერტიკალური ელექტროფორეზის უჯრედის საშუალებით (ავზი/კამერა), თხელი გელი (ჩვეულებრივ 1.0 მმ ან 1.5 მმ) ასხამენ ორ შუშის ფირფიტას შორის და მონტაჟდება ისე, რომ გელის ქვედა ნაწილი ჩაეფლო ბუფერში ერთ პალატაში, ხოლო ზედა ჩაეფლო ბუფერში. სხვა პალატაში. დენის გამოყენებისას, ბუფერის მცირე რაოდენობა გადადის გელის მეშვეობით ზედა კამერიდან ქვედა კამერაში. ძლიერი დამჭერებით, რომლებიც უზრუნველყოფენ ასამბლეის თავდაყირა მდგომარეობაში ყოფნის გარანტიას, მოწყობილობა ხელს უწყობს გელის სწრაფ მუშაობას თანაბარი გაგრილებით, რაც იწვევს მკაფიო ზოლებს.

Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd. (Liuyi Biotechnology) აწარმოებს სხვადასხვა ზომის პოლიაკრილამიდის გელის ელექტროფორეზის უჯრედებს (ტანკებს/კამერებს). მოდელები DYCZ-20C და DYCZ-20G არის ვერტიკალური ელექტროფორეზის უჯრედები (ტანკები/კამერები) დნმ-ის თანმიმდევრობის ანალიზისთვის. ზოგიერთი ვერტიკალური ელექტროფორეზის უჯრედები (ტანკები/კამერები) თავსებადია ბლოტირების სისტემასთან, მაგალითად, მოდელი DYCZ-24DN, DYCZ-25D და DYCZ-25E თავსებადია Western Blotting სისტემის მოდელებთან DYCZ-40D, DYCZ-40G და DYCZ-40F, რომლებიც გამოიყენება ცილის მოლეკულის გელიდან მემბრანაში გადასატანად. SDS-PAGE ელექტროფორეზის შემდეგ, Western Blotting არის ტექნიკა ცილოვან ნარევში სპეციფიკური ცილის გამოსავლენად. თქვენ შეგიძლიათ აირჩიოთ ეს ბლოტირების სისტემები ექსპერიმენტული მოთხოვნების შესაბამისად.

ელექტროფორეზის ელექტრომომარაგება
გელის მუშაობისთვის ელექტროენერგიის უზრუნველსაყოფად, დაგჭირდებათ ელექტროფორეზის ელექტრომომარაგება. Liuyi Biotechnology-ში ჩვენ გთავაზობთ ელექტროფორეზის ელექტრომომარაგების მთელ რიგს ყველა აპლიკაციისთვის. მოდელი DYY-12 და DYY-12C მაღალი სტაბილური ძაბვით და დენით შეუძლია დააკმაყოფილოს მაღალი ძაბვის მოთხოვნილების ელექტროფორეზი. მას აქვს სტენდის, დროის, VH და ეტაპობრივი გამოყენების ფუნქცია. ისინი იდეალურია IEF და დნმ თანმიმდევრობის ელექტროფორეზის გამოყენებისთვის. პროტეინისა და დნმ-ის ელექტროფორეზის ზოგადი გამოყენებისთვის, ჩვენ გვაქვს მოდელი DYY-2C, DYY-6C, DYY-10 და ა.შ. ეს შეიძლება გამოყენებულ იქნას საშუალო და დაბალი ძაბვის ელექტროფორეზის აპლიკაციებისთვის, როგორიცაა სასკოლო ლაბორატორიისთვის, საავადმყოფოს ლაბორატორიისთვის და ა.შ. ელექტრომომარაგების სხვა მოდელები, გთხოვთ ეწვიოთ ჩვენს ვებსაიტს.

Liuyi ბრენდს ჩინეთში 50 წელზე მეტი ხნის ისტორია აქვს და კომპანიას შეუძლია უზრუნველყოს სტაბილური და მაღალი ხარისხის პროდუქტები მთელ მსოფლიოში. წლების განვითარებით, ის თქვენი არჩევანის ღირსია!

ჩვენს შესახებ დამატებითი ინფორმაციისთვის გთხოვთ დაგვიკავშირდეთ ელექტრონული ფოსტით[ელფოსტა დაცულია] or [ელფოსტა დაცულია].

რა არის პოლიაკრილამიდის გელის ელექტროფორეზი?
1. კარენ სტიუარდი დოქტორი პოლიაკრილამიდის გელის ელექტროფორეზი, როგორ მუშაობს ის, ტექნიკის ვარიანტები და მისი გამოყენება