გასულ კვირას გავუზიარეთ რამდენიმე მოსაზრება ცელულოზის აცეტატის მემბრანის ელექტროფორეზის გამოყენების შესახებ და ამ თემას დღეს აქ დავასრულებთ თქვენი მითითებისთვის.
შერჩევა ბუფერული კონცენტრაცია
ცელულოზის აცეტატის მემბრანის ელექტროფორეზის დროს გამოყენებული ბუფერული კონცენტრაცია ზოგადად უფრო დაბალია, ვიდრე ქაღალდის ელექტროფორეზის დროს.ხშირად გამოყენებული pH 8.6Bარბიტალური ბუფერი, როგორც წესი, არჩეულია 0,05 მოლ/ლ-დან 0,09 მოლ/ლ-მდე დიაპაზონში.კონცენტრაციის შერჩევისას ხდება წინასწარი განსაზღვრა.მაგალითად, თუ ელექტროფორეზის პალატაში ელექტროდებს შორის მემბრანის ზოლის სიგრძეა 8-10 სმ, მემბრანის სიგრძის სანტიმეტრზე საჭიროა ძაბვა 25 ვ, ხოლო დენის ინტენსივობა უნდა იყოს 0,4-0,5 mA მემბრანის სიგანეზე თითო სანტიმეტრზე.თუ ეს მნიშვნელობები არ არის მიღწეული ან გადაჭარბებული ელექტროფორეზის დროს, ბუფერის კონცენტრაცია უნდა გაიზარდოს ან განზავდეს.
ზედმეტად დაბალი ბუფერული კონცენტრაცია გამოიწვევს ზოლების სწრაფ მოძრაობას და ზოლის სიგანის ზრდას.მეორეს მხრივ, ზედმეტად მაღალი ბუფერული კონცენტრაცია შეანელებს ზოლის მიგრაციას, რაც ართულებს ცალკეული ზოლების გარჩევას.
უნდა აღინიშნოს, რომ ცელულოზის აცეტატის მემბრანის ელექტროფორეზის დროს დენის მნიშვნელოვანი ნაწილი ტარდება ნიმუშის მეშვეობით, რაც წარმოქმნის სითბოს მნიშვნელოვან რაოდენობას.ზოგჯერ, არჩეული ბუფერული კონცენტრაცია შეიძლება ჩაითვალოს სათანადოდ.თუმცა, გაზრდილი გარემო ტემპერატურის პირობებში ან მაღალი ძაბვის გამოყენებისას, სიცხის გამო წყლის აორთქლება შეიძლება გაძლიერდეს, რაც გამოიწვევს ზედმეტად მაღალ ბუფერულ კონცენტრაციას და მემბრანის გაშრობასაც კი.
ნიმუშის მოცულობა
ცელულოზის აცეტატის მემბრანის ელექტროფორეზის დროს ნიმუშის მოცულობის რაოდენობა განისაზღვრება სხვადასხვა ფაქტორებით, მათ შორის ელექტროფორეზის პირობებით, თავად ნიმუშის თვისებებით, შეღებვის მეთოდებით და გამოვლენის ტექნიკით.როგორც ზოგადი პრინციპი, რაც უფრო მგრძნობიარეა გამოვლენის მეთოდი, მით უფრო მცირეა ნიმუშის მოცულობა, რაც ხელსაყრელია გამოყოფისთვის.თუ ნიმუშის მოცულობა გადაჭარბებულია, ელექტროფორეზული გამოყოფის ნიმუშები შეიძლება არ იყოს მკაფიო და შეღებვა ასევე შეიძლება იყოს შრომატევადი.თუმცა, განცალკევებული შეღებილი ზოლების რაოდენობრივი ანალიზის დროს გამორეცხვის კოლორიმეტრული გამოვლენის მეთოდების გამოყენებით, ნიმუშის მოცულობა არ უნდა იყოს ძალიან მცირე, რადგან ამან შეიძლება გამოიწვიოს გარკვეული კომპონენტების შთანთქმის მნიშვნელობები, რაც გამოიწვევს უფრო მაღალ შეცდომებს მათი შინაარსის გამოთვლაში.ასეთ შემთხვევებში ნიმუშის მოცულობა სათანადოდ უნდა გაიზარდოს.
როგორც წესი, ნიმუშის გამოყენების ხაზის თითოეულ სანტიმეტრზე დამატებული ნიმუშის მოცულობა მერყეობს 0,1-დან 5 μL-მდე, რაც უდრის ნიმუშის რაოდენობას 5-დან 1000 მკგ-მდე.მაგალითად, შრატის ცილის ელექტროფორეზის რუტინული ანალიზის დროს, ნიმუშის მოცულობა, რომელიც დამატებულია განაცხადის ხაზის თითოეულ სანტიმეტრზე, ზოგადად არ აღემატება 1 μL-ს, რაც უდრის 60-დან 80 მკგ პროტეინს.თუმცა, ლიპოპროტეინების ან გლიკოპროტეინების ანალიზისას იგივე ელექტროფორეზის მეთოდით, ნიმუშის მოცულობა უნდა გაიზარდოს შესაბამისად.
დასასრულს, ნიმუშის ყველაზე შესაფერისი მოცულობა უნდა შეირჩეს კონკრეტული პირობების საფუძველზე წინასწარი ექსპერიმენტების სერიის მეშვეობით.
შეღებვის ხსნარის შერჩევა
გამოყოფილი ზოლები ცელულოზის აცეტატის მემბრანის ელექტროფორეზის დროს, როგორც წესი, იღებება გამოვლენამდე.ნიმუშის სხვადასხვა კომპონენტი საჭიროებს შეღებვის სხვადასხვა მეთოდს და შეღებვის მეთოდები, რომლებიც შესაფერისია ცელულოზის აცეტატის მემბრანის ელექტროფორეზისთვის, შეიძლება მთლიანად არ იყოს გამოყენებული ფილტრის ქაღალდზე.
შეღებვის ხსნარის არჩევის სამი ძირითადი პრინციპიაცელულოზის აცეტატის მემბრანა.ჯერ ერთი,წყალში ხსნადი საღებავები უპირატესობას ანიჭებს ალკოჰოლში ხსნად საღებავებს, რათა თავიდან იქნას აცილებული მემბრანის შეკუმშვა და დეფორმაცია, რომელიც გამოწვეულია ამ უკანასკნელის შეღებვის ხსნარით.შეღებვის შემდეგ მნიშვნელოვანია მემბრანის წყლით ჩამობანა და შეღებვის ხანგრძლივობის მინიმუმამდე შემცირება.წინააღმდეგ შემთხვევაში, მემბრანა შეიძლება დახვეული ან შეკუმშული გახდეს, რაც გავლენას მოახდენს შემდგომ გამოვლენაზე.
მეორეც, სასურველია ნიმუშისთვის შეირჩეს ძლიერი შეღებვის მიახლოების მქონე საღებავები.შრატის ცილების ცელულოზის აცეტატის მემბრანული ელექტროფორეზის დროს, ამინო შავი 10B ჩვეულებრივ გამოიყენება შრატის ცილის სხვადასხვა კომპონენტებთან მისი ძლიერი შეღებვის მსგავსების გამო და მისი სტაბილურობის გამო.
მესამე, უნდა შეირჩეს საიმედო ხარისხის საღებავები.ზოგიერთი საღებავი, მიუხედავად იმისა, რომ აქვს იგივე სახელი, შეიძლება შეიცავდეს მინარევებს, რაც იწვევს განსაკუთრებით მუქ ფონს შეღებვის შემდეგ.ამან შეიძლება დაბინდოს თავდაპირველად კარგად გამოყოფილი ზოლები, რაც ართულებს მათ გარჩევას.
და ბოლოს, მნიშვნელოვანია შეღებვის ხსნარის კონცენტრაციის არჩევანი.თეორიულად, შეიძლება ჩანდეს, რომ შეღებვის ხსნარის უფრო მაღალი კონცენტრაცია გამოიწვევს ნიმუშის კომპონენტების უფრო საფუძვლიან შეღებვას და შეღებვის უკეთეს შედეგებს.თუმცა ეს ასე არ არის.ნიმუშის კომპონენტებსა და საღებავს შორის შემაკავშირებელ კავშირს აქვს გარკვეული ზღვარი, რომელიც არ იზრდება შეღებვის ხსნარის კონცენტრაციის მატებასთან ერთად.პირიქით, შეღებვის ხსნარის ზედმეტად მაღალი კონცენტრაცია არა მხოლოდ აფუჭებს საღებავს, არამედ ართულებს მკაფიო ფონის მიღწევას.უფრო მეტიც, როდესაც ფერის ინტენსივობა აღწევს გარკვეულ მაქსიმალურ მნიშვნელობას, საღებავის შთანთქმის მრუდი არ მიჰყვება ხაზოვან ურთიერთობას, განსაკუთრებით რაოდენობრივ გაზომვებში. ცელულოზის აცეტატის მემბრანის ელექტროფორეზის დროს შეღებვის ხსნარის კონცენტრაცია ზოგადად უფრო დაბალია, ვიდრე ქაღალდის ელექტროფორეზის დროს.
დეტალები, რომ იცოდეთ პეკინის ლიუის ბიოტექნოლოგიის შესახებ's ცელულოზის აცეტატის მემბრანაელექტროფორეზის ავზი და მისი ელექტროფორეზის აპლიკაცია, გთხოვთ ეწვიოთ აქ:
ლშრატის ცილის გამოყოფის ექსპერიმენტი ცელულოზის აცეტატის მემბრანით
ლცელულოზის აცეტატის მემბრანის ელექტროფორეზი
თუ თქვენ გაქვთ რაიმე შეძენის გეგმა ჩვენი პროდუქციისთვის, გთხოვთ, ნუ მოგერიდებათ დაგვიკავშირდეთ.შეგიძლიათ გამოგვიგზავნოთ შეტყობინება ელექტრონული ფოსტით[ელფოსტა დაცულია]ან[ელფოსტა დაცულია], ან გთხოვთ დაგვიკავშირდეთ +86 15810650221 ან დაამატეთ Whatsapp +86 15810650221, ან Wechat: 15810650221.
მითითება:ელექტროფორეზი (მეორე გამოცემა) ბატონი ლი
გამოქვეყნების დრო: ივნ-06-2023